超高效液相色譜作為一種先進的分析技術,具有高分辨率、高靈敏度和高效率的特點,在各個領域中發揮著重要的作用。通過自動控制純溶劑或濃溶液的比例來在線配制所需要的流動相,極大地縮短了準備實驗所需要的時間。它可讓您充分利用ACQUITY UPLC H-Class系統四元混合能力的優勢,同時還能管理所選流動相的理想pH和離子強度要求。
以下將對超高效液相色譜其技術特點進行的詳細分析:
1、超高分離度
小顆粒技術:UPLC采用1.7μm的填料顆粒,相比傳統的5μm HPLC填料,這種小顆粒技術使得柱效顯著提高。具體來說,1.7μm顆粒提供的柱效比5μm顆粒提高了3倍,其分離度提升了70%,從而極大增強了色譜的分離能力。
峰容量:在梯度分離中,UPLC也表現出色,用峰容量來衡量其分離能力同樣優異。這使得UPLC可以分離出更多的色譜峰,為樣品提供更詳細的信息。
2、超高速度
快速分析:由于使用1.7μm顆粒,UPLC可以在更短的柱長下保持柱效不變,同時在更高的流速下進行分離,大大加快了分析速度。例如,一些傳統HPLC需要30分鐘的分析時間,UPLC只需5分鐘即可完成,同時達到超過20萬塊/m的理論塔板數。
節省時間:快速的分析不僅提高了工作效率,還節省了方法認證的時間。這使得以往耗時的方法驗證變得簡便快捷。
3、超高靈敏度
高柱效:UPLC使用小顆粒技術不僅改善了分離度,還因為獲得更窄的色譜峰寬而提高了靈敏度。峰高增加,使得檢測限更低,適用于痕量分析。
先進檢測器:配備高速檢測器,能夠應對短時間內出現的多個色譜峰,并具有高數據采集速率(如40點/秒)和極小的流通池體積(如500nL),這些特點都極大提高了檢測的靈敏度。
4、系統整體性能優化
高壓溶劑輸送:UPLC系統設計包括能夠承受超過15000psi的高壓泵,確保在較高壓力下穩定運行。
低系統體積:整體設計考慮了減小系統體積,特別是死體積,以優化分析結果。自動進樣器采用針內針設計,減少死體積和交叉污染,保證了樣品的準確性和重現性。
5、自動化進樣系統
快速進樣周期:UPLC配備先進的自動進樣器,支持高速進樣,減少了樣品周期時間,適合長時間無人值守的操作。
極低交叉污染:進樣系統的設計采用強、弱兩種溶劑清洗步驟,有效降低了進樣時的交叉污染,保證了高通量分析的準確性。